可见波段的CW激光器被广泛用于荧光显微镜中。科学家通过共焦配置来快速、高分辨率的得到来自于特定荧光团或生物标记的细胞、器官、亚细胞结构和活细胞内细胞动力学内的荧光图像。这些成像技术由于阿贝定律的限制,通过激光最多只能达到200 nm的极限分辨率。在过去的十年里,科学家发展了许多的超分辨率成像技术,可以通过操纵荧光信号来超出衍射极限。超分辨率成像技术的例子包括STED,STORM,PALM,SIM和RESOLFT。这些技术的发展推动了在活细胞内分子水平的微生物结构的动态研究,同时彻底改变了光学显微镜领域。
利用GFP和RFP得到的显微镜图像。
共聚焦显微镜原理
在典型的STED显微镜中,荧光激发激光束用环形STED光束共准直,来对除了焦点中心之外的受激区域进行去激发。扫描焦点区域得到的图像即使亚衍射分辨率的图像。在理论上,该技术可以达到的高分辨与快速扫描只受到STED光束强度的限制,主要是STED光束只能通过大而笨重的高功率激光器来得到。但是在Cobolt公司和位于哥廷根的普朗克研究所合作表明,高性能,低噪音,紧凑型CW DPSS激光器也可以用于STED纳米显微镜之中。试验中采用功率为500 mW的Cobolt Flamenco 660 nm激光器作为STED光源,再结合门控方案,这样就既能得到高品质的活细胞STED图像,也能得到高分辨率的FCS。这样的结合表明紧凑型高性能DPSS激光器可以显著的推动STED技术更实际和更经济的实现。
Cobolt是荧光显微镜行业的高性能激光器供应商之一。我们的产品覆盖紫外/可见/近红外波段,匹配常用的所有荧光团,结构精巧,同时具有高速成像技术所需的功率扩展性。
具体产品参数详见产品页。
(翻译:北京鼎信优威光子科技有限公司 汪 阳 博士)