在二极管泵浦固态（DPSS）激光技术的最新进展拓宽了可以用在生命科学研究，特别是流式细胞仪或者共焦显微镜上的波长数目。在流式细胞仪或者共焦显微镜上，波长为532 nm或者561 nm的DPSS激光器正在越来越普及，让科研工作者可以使用这些波长的激光来激发绿色或者黄色的荧光团。但是在黄色的561 nm与红色的氦氖或者二极管激光器（波长为630~640 nm）激光器之间的空白却很难填补。

图1，Cobolt Mambo™ 594 nm激光器
当然氦氖激光器发出的橘色594 nm的激光在某些时候是可以使用的，但是过低的功率阻碍了它与流式细胞仪的集成。虽然共焦显微镜中已经开始使用橘色的氦氖激光器，从而可以使用显微镜观测橘色激发荧光探针；但是流式细胞仪始终无法集成这些应用。由于有相当数目的荧光探针-包括一些最新研制出来的可表达荧光蛋白-处于590~595 nm的激发波段之间。如何让流式细胞仪使用上橘色的激光是流式细胞仪激发能力的最后一个空白。
图2是用594 nm激光器模块的流式细胞仪。一台BD Biosciences LSR II的流式细胞仪集成了Cobolt Mambo 50 mW的模块。

图2，用594 nm激光器模块的流式细胞仪。
594 nm波长的DPSS激光器模块可以完美的激发诸如Texas Red和Alexa Fluor 594，以及最新发展的一些红色荧光蛋白，比如mPlum，TagFP635，TurboFP635和CellTracker Red。
正如图3中的数据所示，594 nm的波长完美的激发了这三种探针。

图3，红色荧光蛋白的激发
594 nm的激光源不仅仅可以激发红色荧光蛋白，还可以用来激发典型有640 nm的二极管激光器激发的APC或者APC-Cy7。这样一个激光波长可以让科研工作者来实现光谱范围在561~640 nm之间的激发。

图4，典型的由640 nm波长的二极管激光器激发的蛋白
对于研究人员和仪器制造商而言，采用橘色这样的新的激发波长，有适用的滤光片也是至关重要的。光学滤光片必须为特定的激光波长设计，同时在最大化荧光仪器的吞吐量，灵敏度和对比度中发挥着重要的作用。Semrock公司的硬镀膜滤光片可以达到荧光滤光片所需要的高边缘陡度，在透过波段的高传输和阻止波段的高截止。

图5，硬镀膜滤光片
Cobolt Mambo™ 594 nm激光器
Cobolt Mambo™ 594 nm激光器是紧凑型DPSS橘色激光器，具有密封包装，可以在594 nm的波长输出100 mW的连续激光，具有非常低的噪音，高质量的TEM00模和低发散角。
典型的噪声性能

Cobolt Zouk^TM激光器的典型噪声性能为峰峰噪声小于3%，rms噪音小于0.3%。这种单模的DPSS激光器由于具有非常好的功率稳定性，非常低的强度噪音（rms<0.3%），完美的低发散角（M²<1.1）TEM₀₀模，是诸如流式细胞仪这样的荧光分析工具的首选。这些性质都是为了得到良好结果所必须的。

（翻译：北京鼎信优威光子科技有限公司  汪 阳 博士）